Para solicitar la secuencia de ADN haga el favor de rellenar la solicitud de pedido.
Indique en esta solicitud de pedido, todas las informaciones necesarias para llevar a cabo correctamente su demanda, tales como el nombre del vector, el modo de purificación, la concentración y el volumen de la muestra, el nombre de los cebadores… Si también requiere de un trabajo suplementario en el ámbito de la biología molecular o de la bioinformática haga el favor de indicárnoslo en la solicitud que debe transmitirnos (puede encontrar las referencias correspondientes en nuestro catálogo)
Una vez cumplimentados todos los datos, deberá imprimirla solicitud de pedido y enviarnosla por correo, o preferentemente por un transportista, junto con las muestras a analizar. Estas, deberán ser enviadas en depósitos de 1.5 ml o 0.5 ml (identificados con su nombre correspondiente que no deberán superar los 4 carácteres) a nuestra dirección :
MilleGen Service d' Analyse Génomique Immeuble BIOSTEP - Bâtiment A rue Pierre et Marie Curie - BP38183 31681 Labège cedex (France)
Acuse de recibo
Una vez recibida su solicitud, le enviaremos un e_mail indicándole el comienzo del tratamiento de su demanda así como el estado en el que recibamos las muestras.
Resultados
Recibirá por e_mail las secuencias texto (txt.) y los cromatogramas (ab1).En el caso de que se trate de una secuencia de alta producción, usted podrá descargar directamente los ficheros correspondientes desde nuestro servidor de manera confidencial y segura.
Demora
Las secuencias simple hebra o doble hebra, serán enviadas por e_mail con un tiempo de espera de 24h tras la recepción de la muestra (siempre y cuando la recepción se efectue antes de las 11h) y de 1.5Kb/semana, en el caso de secuencias de mayor tamaño.
Los resultados dependen de la calidad y de las distintas particularidades del ADN. En el caso de no obtener ningun resultado tras 3 intentos, le facturaremos únicamente 8 euros (precio mínimo establecido) por reacción (referencia SECH0001)
Preparación de la muestra
La calidad del ADN es esencial para la obtención de buenos resultados
Le aconsejamos que nos envie los clones bacterianos para que podamos realizar la preparación del ADN. También deberá comprobar la concentración por espectrofotometría, así como la integridad del ADN haciéndolo migrar por electroforesis en un gel de agarosa (incluyanos la fotografía en su pedido). Los tubos que contengan la muestra deberán estar bien cerrados (ayudese de parafilm) y en un soporte rígido y estable para evitar cualquier tipo de deterioro durante su transporte. No existe ningun inconveniente si quiere enviarnos las muestras a temperatura ambiente.
Plásmidos
Envienos 3µg de plásmido (0.2 µg/µl) en 15 µl de agua milli Q, 10µg de cosmido, BAC, PAC o fago en 25 µl de agua milliQ. En el caso de que su ADN tenga alguna particularidad (% GC elevado, repeticiones importantes, estructuras hairpin…) haganosló saber y piense en solicitar el protocolo de secuencia complicada (referencia SADN0007).
Bacterias
Puede enviarnos los clones bacterianos en stock glicerol, en cultivo fresco de LB líquido o sobre LB agar.
Productos de PCR
Puede enviarnos el material obtenido por pCR, purificado (20 ng/100 bases) o no purificado (deberá entonces solicitar un protocolo de purificación de productos obtenidos por pCR : SPCR0002). En este punto, es imprescindible la eliminación de los cebadores y de los dNTP ya que si no la reacción para obtener la secuencia no podrá llevarse a cabo. El material obtenido por pCR debe estar validado haciéndolo migrar en un gel de agarosa (no deben aparecer bandas parásitas en la fotografía). Si lo desea, siempre podremos purificar sobre un gel su banda de interés (referencia SPCR 0005).
Cebadores Los cebadores universales son proporcionados de manera gratuita (vea nuestra lista de cebadores).
En el caso de que se trate de cebadores específicos, puede, o bien hacérnoslos llegar con el pedido (1.5 µl a una concentración de 10µM son necesarios para la obtención de entre 1 a 5 secuencias) o indicarnos sobre su solicitud las secuencias de sus cebadores (referencia SSOL0001).
